typer af gelelektroforese

Gel elektroforese er et laboratorium, teknik , der adskiller organiske molekyler ved hjælp af en elektrisk strøm til at udarbejde molekyler af forskellige størrelser gennem porerne i en gel matrix . Forskellige molekyler sorteres baseret på elektrisk ladning eller molekyle størrelse molekyler , der er kortere i længden eller højere i omkostning flytte i et hurtigere tempo mod terminalen elektrode . Disse forskellige molekyler er i forhold til molekyle fragmenter af kendt længde . Almindelige anvendelser af denne proces, omfatter foster screening for genetiske sygdomme eller lidelser og genetiske fingeraftryk .

SDS-PAGE

For at elektroforese proteinmolekyler , er det normalt nødvendigt at denaturere dem først , fordi et protein sekundære , tertiære og kvaternære strukturer er bøjet og foldet gøre denne teknik umuligt, den primære struktur af et protein er en lige polypeptid kæde . SDS ( natriumdodecylsulfat ) er et vaskemiddel , der opløser de obligationer , der giver proteiner deres foldede konfigurationer , og sulfat gør kæden negativt ladede . SIDE ( polyacrylamid gel elektroforese ) er den proces , hvorved fragmenter af disse denaturerede proteiner vandrer mod den positive elektrode gennem gelen matrix , polyacrylamid . Pletter anvendes på det protein fragmenter for at se dem i gelen . Et problem med denne metode er , at det kun skiller fragmenter efter størrelse , snarere end aminosyresekvens . så det er vanskeligt at afgøre præcist protein type ved hjælp af denne metode

agarose gelelektroforese

DNA og RNA molekyler , der allerede udfører en negativ ladning som følge af organisk phosphat gruppe del af deres sukker-fosfat backbone , hvilket fosfat er negativt ladet leverer en netto negativ ladning til hele molekylet . Agarose danner en kompleks matrix , hvorigennem nukleotider kan migrere . Højere koncentrationer af agarose i opløsning vil give mulighed for lettere at adskille mindre fragmenter , mens det omvendte er tilfældet for større molekyler . Mindre genetiske kæder migrere længere og hurtigere end større kæder , også de højere anvendte spænding , desto hurtigere vil molekylerne bevæge sig . En plet , ofte EtBr ( ethidiumbromid ) , der bruges til at observere fragment bands , som er målt i forhold til kendte DNA fragmenter . En ulempe ved denne metode er , at gelen har potentiale til at smelte i løbet af elektroforese .

Mindre fælles protokoller

Sequencing geler opnås ved denaturering DNA molekyler med varme og bruge en polyacrylamid gel i nærheden af denatureringen temperatur . Ofte er substrater indeholder andre denatureringen forbindelser . Denne type elektroforese giver mulighed for isolation af DNA- sekvenser , der adskiller sig ved så lidt som en base par . Elektrofokuseringskammer gel giver mulighed for en adskillelse af proteinmolekyler uden denaturering dem , proteiner vandrer baseret på deres modersmål beregning . Dette opnås ved bevidst at hælde en gel med en pH-værdi gradient fra den ene ende til den anden . Da proteinerne vandrer de søger en pH , ved at tilføje eller miste ioner , hvilket vil give den en neutral afgift , her bliver det koncentreret , eller sidder fast .

4150253412.pdf 5150253413.pdf


Kommentarer

Vi ønsker, at dine argumenter og meninger er velkomne. Være objektiv og medfølelse. Mange mennesker læser hvad du skriver. Gør debat til en bedre oplevelse for både dem og dig selv. Mellem 20:00 og 08:00 det er lukket for kommentering og vi fjerner automatisk kommentarer med sjofle ord, defineret af vores moderatorer.

link:

  • Om os
  • Advertising
  • Fortæl redaktionen
  • Få nyhedsbreve
  • RSS-feed

Redaktør: Karin Christofferse
Nyheder redactor: Morten Nyberg

Kundeservice: Stig Ole Salomon,
Flemming Sørensen

Tel: +45 00 99 99 00
Fax: +45 00 99 99 01

© Copyright 2014 Einsten.net - All rights reserved.