electroblotting protokol

Biologer har ofte brug for at adskille proteiner og nukleinsyrer ( DNA og RNA ) på grundlag af størrelse eller afgift , ved hjælp af en teknik kaldet gelelektroforese . Bagefter kan biologerne overføre prøve fra gel til en membran til identifikation. Dette er kendt som electroblotting

gelelektroforese

I gel elektroforese , en elektrisk felt årsager proteiner eller DNA-fragmenter til at rejse gennem en plade af gel . Mindre fragmenter eller proteiner flytte hurtigere end større partikler .



Når proteiner eller fragmenter er adskilte , kan biologerne overføre dem til en membran og enten bejdse dem , eller bruge antistoffer at identificere specifikke proteiner .

Electroblotting

Selv om den præcise protokollen varierer , electroblotting typisk omfatter følgende trin .



Efter elektroforese , forskere placere gel pladen på toppen flere ark filtrerpapir og en svamp nedsænkes i en overførsel bufferopløsning . De derefter placere en nitrocellulose eller PVDF membranen over gelen , og dække det med mere filtrerpapir .



Anvendelse af en elektrisk felt får negativt ladede fragmenter eller proteiner at migrere opad fra gel til membranen . På dette tidspunkt kan forskerne fjerne og sonde membranen .

Overvejelser

Når lagdeling membranen og gel for electroblotting , er det vigtigt at fjerne luftbobler , som de kunne forhindre migration af proteiner eller nukleinsyrer .



elektroforese efterfulgt af electroblotting er typisk en foreløbig til vestlige , nordlige og sydlige blotting , som alle kan identificere specifikke DNA /RNA fragmenter eller proteiner .

9210258050.pdf 9210258053.pdf


Kommentarer

Vi ønsker, at dine argumenter og meninger er velkomne. Være objektiv og medfølelse. Mange mennesker læser hvad du skriver. Gør debat til en bedre oplevelse for både dem og dig selv. Mellem 20:00 og 08:00 det er lukket for kommentering og vi fjerner automatisk kommentarer med sjofle ord, defineret af vores moderatorer.

link:

  • Om os
  • Advertising
  • Fortæl redaktionen
  • Få nyhedsbreve
  • RSS-feed

Redaktør: Karin Christofferse
Nyheder redactor: Morten Nyberg

Kundeservice: Stig Ole Salomon,
Flemming Sørensen

Tel: +45 00 99 99 00
Fax: +45 00 99 99 01

© Copyright 2014 Einsten.net - All rights reserved.