hvad er de funktioner agarose gel i elektroforese ?

agarosegel elektroforese er en laboratorieteknik , som proteiner er adskilt fra hinanden på grundlag af størrelse . En prøve af blandet proteiner , ofte segmenter af DNA eller beslægtede molekyler , er placeret i den ene ende af et ark agarose gel . Elektricitet anvendes derefter til gel og negativt ladede nukleinsyrer i proteinerne er tiltrukket af den positive ladning i den anden ende af gelen med mindre proteiner bevæger sig længere end store , der udgør en række bands fra hvert protein størrelse .

Underlag

Agarose gel er en polysaccharid , der danner en gelatine-lignende matrix . Gelen giver et underlag , som DNA adskillelse kan forekomme . Større DNA-fragmenter tage længere tid at migrere gennem masken af matricen . Dette fænomen gør adskillelsen af molekyler efter størrelse .

resolution

DNA varierer i størrelse fra nogle få basepar op til flere millioner basepar kan adskilles ved hjælp af agarose gel elektroforese . Koncentrationen af agarose bruges til at gøre gelen bestemmer klarhed i beslutningen af proteinet partikler . Mindre DNA-molekyler er mere tydeligt løst, når en højere koncentration af agarose gel bruges , når du kører prøven .

Buffer Absorption

For at anvende en elektrisk ladning til DNA-prøven , skal agarosegelen være mættet med en salt -holdige buffer opløsning. To populære buffer løsninger er TAE ( Tris-acetat-EDTA ) og TBE ( Tris-borat-EDTA ) . Buffere skal tilføjes en præcis koncentration en alt for fortyndet buffer vil hæmme bevægelse af protein partikler og en alt for koncentreret buffer kan blive overophedet , når elektricitet anvendes og den overskydende varme kan smelte gel eller beskadige proteiner .

Dye Kontrast Baggrund

Fluorescerende farvestoffer såsom ethidiumbromid kan føjes til en prøve med henblik på at visualisere den separerede DNA proteiner , når elektroforese er færdig. Dette farvestof obligationer til rummene mellem nukleinsyrer af DNA . Agarosegelen giver en visuel kontrast til de farvestoffer , således at placeringen af hvert bånd af protein kan klart skelnes .

Reference

En referenceprøve af proteiner med kendt størrelse , benævnt en "stigen " er ofte kører parallelt med den pågældende prøve . Da alle proteiner af samme størrelse og form bevæge sig med samme hastighed i samme koncentration agarose gel , kan placeringen af stigen proteiner i forhold til prøven skal anvendes til at bestemme størrelsen af proteinerne i spørgsmålet .

Protein Capture

Når disse proteiner er blevet adskilt , agarosegelen holder dem på plads , når el er slukket . Hvert bånd af proteiner kan derefter enkeltvis fjernes fra gelen og behandles for yderligere undersøgelser eller eksperimenter .


Kommentarer

Vi ønsker, at dine argumenter og meninger er velkomne. Være objektiv og medfølelse. Mange mennesker læser hvad du skriver. Gør debat til en bedre oplevelse for både dem og dig selv. Mellem 20:00 og 08:00 det er lukket for kommentering og vi fjerner automatisk kommentarer med sjofle ord, defineret af vores moderatorer.

link:

  • Om os
  • Advertising
  • Fortæl redaktionen
  • Få nyhedsbreve
  • RSS-feed

Redaktør: Karin Christofferse
Nyheder redactor: Morten Nyberg

Kundeservice: Stig Ole Salomon,
Flemming Sørensen

Tel: +45 00 99 99 00
Fax: +45 00 99 99 01

© Copyright 2014 Einsten.net - All rights reserved.