gelelektroforese lab procedurer

Gelelektroforese er en metode , der anvendes i laboratorier til at måle og sortere DNA-strenge . Det er nødvendigt, fordi DNA under normale forhold er for lille til at manipulere , selv når den ses med de mest mikroskoper . Gelelektroforese er en relativt enkel procedure , og det samme grundlæggende teknik kan bruges til at adskille de enkelte proteiner , samt

gelematrice <. /h2 > Til at begynde gel elektroforese , skal du først oprette gel . Typisk er geler lavet i tynde plader, som benytter et stof kaldet agarose . Pulveriseret agarose er placeret i en kolbe , efterfulgt af en saltvand løsning kaldet en buffer . Denne blanding af agarose og buffer er opvarmes, indtil de to stoffer smelter sammen , hældes i en danner skimmel . En enhed kaldet en kam er derefter placeret i den ene ende af formen før gel køler . Når gelen er afkølet , er kammen fjernes , efterlader lidt slots , som vil blive brugt til at holde DNA-prøver .

Et særligt kendetegn ved den afkølede agarose blandingen ( kaldet en gel matrix ) stammer fra det faktum, at det er skabt med saltvand . Hvornår elektrificeret , vil matricen blive ledende , så elektricitet til at flyde langs dens længde . En anden speciel egenskab ved gel-matricen er tilstedeværelsen af regelmæssige , mikroskopiske huller . Disse huller vil gøre det muligt DNA-strenge til at rejse gennem gelematrice og lette sorteringen .

Den Elektroforese Afdeling

Det næste skridt er at skabe en elektroforese kammer . Dette er en lille firkantet kasse , kabel med en positiv og negativ elektrisk forbindelse i begge ender . Chambers er typisk lavvandet , lille nok til at passe på en bordplade , og bygget fra klart materialer som plexiglas .

Salt opløsning i vand hældes i bunden af elektroforese kammer , og gelen matrix er nedsænket lidt inden denne løsning . Saltvandet tjener to formål : medvirken strømmen af elektricitet og holde gelematrice fugtig. Da DNA er drives af en negativ ladning , skal du placere dine matrix , så dine prøver vil blive placeret ved siden af din negative elektrisk forbindelse.

Forberedelse af DNA

DNA-prøver er herefter udarbejdet . Da DNA i opløsning er næsten umuligt at se , et farvestof kaldet en loadingbuffer tilsættes til hvert enkelt prøve . Denne agent også tykkere DNA løsning , hvilket gør det mindre løbende og mere brugbar . Ved hjælp af en pipette en prøve af DNA opløsning i hvert skiftevis slot i gelen matrix . I det tomme slot mellem hver prøve , sted nogle opløsning af DNA , hvis længde du allerede kender ( kaldet DNA standard ) til eksperiment kontrol og sammenligning .

Tænd for strømmen

Nu , skal du tænde din elektroforese kammer . Under negative kraft , vil din DNA-prøver blive tvunget på kryds af kammeret . Små DNA-strenge vil gå hurtigere gennem gelen matrix , og i en kort tid vil de adskille sig fra længere , langsommere tråde . Farvestoffet i farvestoffet kan du følge sporet af DNA . Du vil ikke være i stand til at se de enkelte DNA-strenge , men dele af samme længde vil klumpe sig sammen .

endelige skridt

Når DNA er sorteret ud , matricen er fjernet fra elektroforese kammeret . DNA er så farves at give mulighed for lettere at måle og eksamen .


Kommentarer

Vi ønsker, at dine argumenter og meninger er velkomne. Være objektiv og medfølelse. Mange mennesker læser hvad du skriver. Gør debat til en bedre oplevelse for både dem og dig selv. Mellem 20:00 og 08:00 det er lukket for kommentering og vi fjerner automatisk kommentarer med sjofle ord, defineret af vores moderatorer.

link:

  • Om os
  • Advertising
  • Fortæl redaktionen
  • Få nyhedsbreve
  • RSS-feed

Redaktør: Karin Christofferse
Nyheder redactor: Morten Nyberg

Kundeservice: Stig Ole Salomon,
Flemming Sørensen

Tel: +45 00 99 99 00
Fax: +45 00 99 99 01

© Copyright 2014 Einsten.net - All rights reserved.