Formålet med cellelysis løsning

Celler er de grundlæggende strukturelle og funktionelle enheder af det menneskelige legeme . De indeholder flere forskellige dele, kaldet organeller , der bidrager til cellens evne til at operere . Energi leveres af mitokondrier , er proteiner syntetiseret på ribosomer , er DNA findes i kernen og så videre . Hvis en videnskabsmand er interesseret i at studere et bestemt element i en af disse organeller , er det nødvendigt at bryde cellen åbne eller lyseres det , at isolere organeller interesse fra resten af cellen .

cellelysis

animalske celler er bundet af en semi-permeabel cellemembranen . Inde i cellen er organeller suspenderet i en væske kaldet cytosol , eller cytoplasma . Cytosolen indeholder sukker, salte opløselige proteiner og de strukturelle proteiner af cytoskeleton-en struktur , der opretholder cellens form . Cellemembranen kan brydes , eller lyseret , mekanisk , kemisk eller ved en kombination af de to . For kemiske lysis , cellerne suspenderet i en opløsning, som indeholder rengøringsmidler og /eller andre reagenser , der interfererer med de kemiske bindinger bedriften membranproteiner sammen . Dette resulterer i membran brud og frigivelse af intracellulære komponenter .

subcellulære Fraktionering

Når cellerne har været lyseres , er det nødvendigt at adskille organel eller protein af interesse fra resten af komponenterne . Differential centrifugering bruger tyngdekraften til at adskille objekter ved tæthed . Test rør, der indeholder celle løsninger er spundet i en centrifuge på gradvis højere omdrejninger ( omdrejninger per minut ) , hvilket skaber en pille eller en brøkdel , der indeholder det tungeste organeller i bunden af glasset med hver tur.

Rensning

Når brøkdel af interesse er opnået , skal det renses . Oprensning fjerner forurenende stoffer ved at udnytte forskelle i molekylære egenskaber , såsom afgift , form eller størrelse . For eksempel kan den brøkdel af interesse indeholder to proteiner , der pilleteret sammen på grund af ligheder i tæthed på trods af at de har meget forskellige størrelser . At adskille uønskede protein fra den ene undersøgte , ville det være logisk at anvende en anden metode til at isolere proteiner efter størrelse .

relevans for Human Disease

Evnen til at lysere cellerne og separate, specifikke komponenter har givet medicinske forskere og drug udviklere med vigtige indsigter i epidemiologi af visse sygdomme hos mennesker . For eksempel kan membraner af kræftceller sammenlignes med de normale celler med henblik på at udvikle behandlinger, som ødelægger kræftcellerne , men er ufarlige for raske celler . Cellelysis også bruges til at studere Alzheimers sygdom , metaboliske sygdomme og meget mere .

Overvejelser

Ikke alle celler er skabt lige , så det er vigtigt at tilpasse protokol, som bruges til lysis til de særlige kendetegn ved netop dit cellepopulation . Det er ligeledes vigtigt at overveje, præcis hvordan du planlægger at studere den del af renter . Hvis du ønsker at prøve aktiviteten af et enzym , ville det være ulogisk at anvende en løsning , der kan ødelægge enzymets funktion . Producenter af kemiske reagens -kits , der anvendes til celle lysis er normalt glade for at hjælpe dig med at bestemme dine behov .


Kommentarer

Vi ønsker, at dine argumenter og meninger er velkomne. Være objektiv og medfølelse. Mange mennesker læser hvad du skriver. Gør debat til en bedre oplevelse for både dem og dig selv. Mellem 20:00 og 08:00 det er lukket for kommentering og vi fjerner automatisk kommentarer med sjofle ord, defineret af vores moderatorer.

link:

  • Om os
  • Advertising
  • Fortæl redaktionen
  • Få nyhedsbreve
  • RSS-feed

Redaktør: Karin Christofferse
Nyheder redactor: Morten Nyberg

Kundeservice: Stig Ole Salomon,
Flemming Sørensen

Tel: +45 00 99 99 00
Fax: +45 00 99 99 01

© Copyright 2014 Einsten.net - All rights reserved.