hvordan man bruger bakken reaktion til at måle fotosyntesen

Planter bruger sollys til at omdanne kuldioxid i fødevarer gennem fotosyntese . Hill reaktion er den del af den proces, hvor elektroner fra vand flytte til en elektron acceptor . Du kan måle denne reaktion i laboratoriet ved hjælp af en kunstig elektron acceptor og isolerede grønkorn

Du skal bruge: .
5 til 6 deveined spinatblade
Chilled mørtel blok .
Støder .
Strejf af sand .
Kølet Tris-NaCl-opløsning .
Ostelærred .
2 kølede 15 ml centrifugeglas .
Pasteur pipette .
Chilled reagensglas .
Vand .
aluminiumsfolie .
2 , 6- dichlorophenolindophenol farvestof ( DCIP ) .
Spektrofotometer .
4 reagensglas og rack .

Gøre Chloroplast Suspension


1 .
afvejes fem spinatblade . Tilføj eller fjerne blade for at få en samlet vægt på omkring 4 g.
2 .
Skær spinatblade med en saks . Placer hakkede blade i en kølet morter blok . Tilsættes 15 ml Tris-NaCl -løsning og et strejf af sand . Slibe løsning med en støder i ca 2 minutter .
3 .
Si løsning gennem en ostelærred i en kølet 15 ml centrifugeglas , og kør centrifugeres ved 200 G i 1 minut .
4 .

dekanteres den flydende del af løsningen , kaldet supernatanten , i et kølet centrifugerør . Spin på 1. 300 G i 5 minutter.
5 .
Supernatanten . Tilsættes 10 ml Tris-NaCl . Resuspender løsning ved at trække det ind i en Pasteur-pipette og slippe den tilbage i centrifugeglas .
6 .
Overfør 4 ml af opløsningen i en ren , kølet reagensglas . Dæk med selvtættende film og vend for at blande.
7 .
Hold grønkornene suspensionen på is , når den ikke er i brug .

Måling Hill Reaktion


1 .
Indstil spektrofotometeret til at tage målinger ved 600 nanometer ( nm ) , og lad den varme op i 5 minutter.
2 .
Put 3,5 ml af Tris-NaCl opløsning i et reagensglas og blandes med 0,5 ml vand og 0,5 ml af kloroplast suspension i henhold til et eksperiment udarbejdet af Weber State University zoologi professor Jon Clark , baseret på lærebogen " Laboratory Undersøgelser i Cell og Molekylær Biologi . " Ombryd reagensglasset med folie . Efter 10 minutter tager en absorbans læsning med et spektrofotometer i nanometer og skrive det ned .
3 .
Put 3,5 ml tris-NaCl opløsning i en anden reagensglas og der tilsættes 0,5 ml af DCIP ( en kunstig elektron acceptor ) , 0,5 ml vand og 0,5 ml af chloroplast suspensionen . Umiddelbart optage et spektrofotometer læsning . Glasset anbringes i et reagensglas rack , tænde lys , og optage spektrofotometer aflæsninger hvert minut for i alt 10 minutter .
4 .
Subtraher absorbansen værdi i sidste øjeblik fra den oprindelige absorbansen værdi for hvert rør . Resultatet er den delta En værdi , ændringen i den læsning over tid . For den anden reagensglasset , fratræk absorbansen læsning på hvert et minut fra den oprindelige absorbansen læsning . Optag dem, delta En værdier på et separat diagram .
5 .
Plot Delta en over tid på en graf for begge rør . Brug tid i sekunder , da X eller vandrette akse og delta A i nanometer som Y eller lodrette akse . Forbind begyndelsen og slutningen point for hvert glas. Formen på kurven for den anden test røret er måling af Hill reaktionen i nanometer per sekund ( nm /s ) .

gode råd og advarsler


  • Må eksperimentet i en semidark rum for at begrænse virkningerne af omgivende lys .
  • Tag aflæsninger så hurtigt som muligt for størst nøjagtighed .
  • Må ikke at udarbejde en tube , indtil du er klar til at tage . læsning
  • Du kan tilføje hæmmere såsom 3-( 3 , 4- dichlorphenyl ) -1 til 1 dimethylurea ( DCMU ) eller ammoniak til grønkornene løsningen i en anden reagensglas se , hvordan de påvirker den sats af Hill reaktion.

  • Kommentarer

    Vi ønsker, at dine argumenter og meninger er velkomne. Være objektiv og medfølelse. Mange mennesker læser hvad du skriver. Gør debat til en bedre oplevelse for både dem og dig selv. Mellem 20:00 og 08:00 det er lukket for kommentering og vi fjerner automatisk kommentarer med sjofle ord, defineret af vores moderatorer.

    link:

    • Om os
    • Advertising
    • Fortæl redaktionen
    • Få nyhedsbreve
    • RSS-feed

    Redaktør: Karin Christofferse
    Nyheder redactor: Morten Nyberg

    Kundeservice: Stig Ole Salomon,
    Flemming Sørensen

    Tel: +45 00 99 99 00
    Fax: +45 00 99 99 01

    © Copyright 2014 Einsten.net - All rights reserved.