struktur gelelektroforese

Gelelektroforese bruges til at adskille forskellige størrelser proteiner og nukleinsyre ( DNA eller RNA ) fragmenter . Det er en af de mest almindeligt anvendte teknikker i molekylær biologi og biokemi . Gelelektroforese anvender en elektrisk strøm til at adskille blandinger af molekyler gennem en stationær gel materiale

Gel Ingredienser

Gelen er sammensat af enten agarose -eller polyacrylamid , afhængig af hvilke forbindelser der skal adskilles . Agarose er en lang kæde polysakkarid , der er isoleret fra tang . Koncentrationer af agarose spænder fra 0,5 procent til to procent . Som den koncentration af agarose stiger, stivhed gelen stiger . Agarose geler er udarbejdet ved at blande agarose pulver med en bufferopløsning , varme den, indtil den smelter , og derefter hælde det i gelen casting skuffen .

polyakrylamidgel er meget mere vanskeligt at udarbejde . De består af acrylamid i koncentrationer mellem 3,5 procent og 20 procent , der er polymeriseret. Da ilt griber ind i den polymeriseringsproces er geler hældes i mellem glasplader.

Bruger

agarosegel typisk arbejder for adskillelse DNA-fragmenter mellem 200 og 50. 000 basepar i længden .

Polyacrylamid geler bruges til at adskille proteiner blandinger . De er også nyttige i at adskille DNA- fragmenter , der er mindre end 500 basepar lange .

Teknik

Når geler er dannet, prøven af proteiner eller nukleinsyrer er deponeret i huller , eller brønde , inden for gel . Gelen er nedsænket i en bufferopløsning , der hjælper med elektrisk strøm transmission og pH stabilisering . En elektrisk strøm anvendes derefter på gelen . Gelelektroforese er en effektiv adskillelse teknik , fordi ladede molekyler bevæge sig i retning af den modsatte polaritet , når en som er pålagt afgift . Da molekylerne bevæge sig gennem den porøse struktur af gelen , jo mindre molekyler bevæger sig hurtigere og længere gennem hullerne end de større molekyler . Når migrationen af molekyler er færdig, fragmenter er farvet med ethidiumbromid , et fluorescerende farvestof .

Resultater

Når du har udfyldt gelelektroforese , lab forskere undersøge resultaterne umiddelbart at forhindre yderligere migration af partikler i gelen . Gel plade er undersøges på en ultraviolet transilluminator .

Overvejelser

Materialer , der anvendes under gelelektroforese betydelig indvirkning på effektiviteten af adskillelse af molekyler . Koncentrationen af den anvendte gel påvirker den lethed , hvor molekyler er i stand til at rejse . De anvendte spænding påvirker hastigheden af molekyler , der giver mulighed for større molekyler at bevæge sig forholdsmæssigt hurtigere end de mindre molekyler med øget spænding . Bufferopløsningen også indflydelse på antallet af migration af molekyler .


Kommentarer

Vi ønsker, at dine argumenter og meninger er velkomne. Være objektiv og medfølelse. Mange mennesker læser hvad du skriver. Gør debat til en bedre oplevelse for både dem og dig selv. Mellem 20:00 og 08:00 det er lukket for kommentering og vi fjerner automatisk kommentarer med sjofle ord, defineret af vores moderatorer.

link:

  • Om os
  • Advertising
  • Fortæl redaktionen
  • Få nyhedsbreve
  • RSS-feed

Redaktør: Karin Christofferse
Nyheder redactor: Morten Nyberg

Kundeservice: Stig Ole Salomon,
Flemming Sørensen

Tel: +45 00 99 99 00
Fax: +45 00 99 99 01

© Copyright 2014 Einsten.net - All rights reserved.